国产精品国产三级区别第一集,亚洲精品国产成人,精品人妻无码一区二区三区,人妻熟妇乱又伦精品视频

咨詢熱線

15000266580

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  細(xì)胞復(fù)蘇凍存注意事項(xiàng)

細(xì)胞復(fù)蘇凍存注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2018-08-22      點(diǎn)擊次數(shù):1853
  細(xì)胞復(fù)蘇凍存注意事項(xiàng)
  凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融
  當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細(xì)胞器脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。
  如果緩慢冷凍,可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。
  慢凍程序
  1.  標(biāo)準(zhǔn)程序:采用細(xì)胞凍存器
  當(dāng)溫度在-25 ℃以上時(shí),  1~2 ℃/min;
  當(dāng)溫度達(dá)-25 ℃以下時(shí), 5~10 ℃/min;
  當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí),可迅速放入液氮中。
  2.  簡(jiǎn)易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2 ℃的速度,在40 min內(nèi)降至液氮表面過夜,次晨投人液氮中。
  3.  傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃ 10 分鐘→ -20℃ 30 分鐘→ -80℃ 16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
  細(xì)胞凍存方法
  1.  預(yù)先配制凍存液
  (1)10%DMSO + 細(xì)胞生長(zhǎng)液(20%血清+基礎(chǔ)培養(yǎng)液)
  2.  取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量?jī)龃嬉海?用吸管吹打制成細(xì)胞懸液(1×106 ~ 5 ×106細(xì)胞/ml)。
  3.  加入1 ml細(xì)胞于凍存管中,密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。
  保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法
  1.  快速解凍
  凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動(dòng)冷凍管,使其在1 分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3 分鐘)。
  2.  解凍后的細(xì)胞可直接接種到含*生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時(shí)后再用新鮮*培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。
  3.  如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含*生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
聯(lián)系方式

郵箱:xiangfbio@163.com

地址:上海市虹口區(qū)四平路710號(hào)7層

咨詢熱線

400-821-8510

(周一至周日9:00- 19:00)

在線咨詢
  • 掃一掃 微信咨詢

Copyright©2025 上海復(fù)祥生物科技有限公司 All Right Reserved    備案號(hào):滬ICP備10013034號(hào)-2     sitemap.xml
技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登陸
国产精品无码久久综合网| 国产无遮挡又黄又爽在线观看| 亚洲人妻| 美女视频黄是免费| 日本一区二区三区免费更新不卡| 中文字幕 一区二区三区| 亚洲人成网站观看在线播放| 久久精品麻豆日日躁夜夜躁妓女| 无码国产精品一区二区高潮| 欧美巨大乳bbwvideos| 免费看韩国黄a片在线观看| 欧美xxxxx高潮喷水| 人妻熟妇乱又伦精品视频中文字幕| 狠狠综合久久AV一区二区三区| 无码少妇高潮浪潮AV久久| 亚洲色无码A片一区二区麻豆| 曰本性l交片免费看| 精品国产自在现偷| 国产亚洲精品A在线无码麻豆| 国产精品无码专区在线播放| 久久午夜伦鲁片免费无码| 久久日本片精品AAAAA国产| 国产欧美成人一区二区A片| 亚洲av无码精品色午夜app| 欧美老妇与zozoz0交| 一女被二男吃奶a片免费观看| 国产精品扒开腿做爽爽的视频| 亚洲中文字幕无码av永久| 亚洲一区爱区精品无码| 精品人妻无码专区中文字幕| 久久国产成人精品国产成人亚洲 | 12裸体自慰免费观看网站| 无码欧美人xxxxx日本漫画| 欧美成人乱码视频xxxx| 天天躁日日躁狠狠躁人妻| 久久亚洲精品成人AV无码网站| 久久产精品一区二区三区| 欧美性猛交久久久乱大交| 国产传媒果冻天美传媒怎么入职| 色偷偷偷久久伊人大杳蕉| 免费国产黄网站在线观看动图|